%0 Journal Article
%T 抗vegfr-2全人源igg1抗体的构建及其在cho-k细胞中的表达
%A 李致科
%A 何远
%A 张娟
%A 解伟
%A 曹婉璐
%A 王泽根
%A 王旻
%J 药学学报
%P 1544-1549
%D 2013
%X 本文在实验室构建的单链抗体-fc融合抗体[scfv(ak404r)-fc]的基础上构建抗vegfr-2全人源igg1样全长抗体(mab-04)。利用重叠pcr,获得mab-04的轻链和重链的核酸序列后分别克隆到真核表达载体pcdna3.1,获得重组质粒。脂质体法将重组质粒转染至cho-k细胞,经proteina柱纯化细胞培养上清液获得目的蛋白,利用westernblotting检测目的蛋白,elisa检测mab-04与抗原亲和力。测序表明重组质粒构建成功,westernblotting检测显示目的蛋白成功表达(1μgsml-1),elisa检测阐明该抗体能与抗原结合并呈浓度依赖性(ic50为50nmolsl-1),表明mab-04成功表达并正确装配,为进一步大量制备该抗体及其活性研究打下基础。
%K vegfr-2
%K 全长抗体
%K 抗肿瘤血管生成
%U http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract6637.shtml