%0 Journal Article
%T 抗vstm1-v2细胞因子人源化单链抗体文库的构建及筛选
%A 傅晓金
%A 张勇侠
%A 代云见
%A 王明蓉
%J 药学学报
%P 1651-1656
%D 2013
%X 本文将鼠源vh-cdr3库(libraryofmurinevh-cdr3)移植到特定的人源scfv(single-chainantibodyfragment)vh3-vκ1框架构建人源化scfv文库,快速筛选抗vstm1-v2的人源化单链抗体。以抗vstm1-v2鼠源cdna为模板,扩增出鼠源vh-cdr3库,随后将鼠源vh-cdr3库移植到人源scfv(vh3-vκ1)上并通过核糖体展示富集抗vstm1-v2人源化scfv文库,该文库序列通过与原核基因表达调控等成分(n端添加t7启动子、sd序列和pelb序列、c端添加his标签序列和t7terminal序列)拼接,构建表达型ta载体转化大肠杆菌bl21(de3)进行可溶性表达。最终构建了一个库容达1012的人源化单链抗体文库,完成了1000个克隆的初步鉴定,并筛选出ec50达21.35nmol·l-1的抗vstm1-v2人源化scfv。该研究结果,一方面获得了具有潜在应用价值的抗-vstm1-v2先导抗体;另一方面,为快速获得人源化抗体提供了一个新技术途径。
%K vstm1-v2细胞因子
%K 鼠源vh-cdr3
%K 改良的ta克隆
%K 人源化单链抗体
%U http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract6619.shtml