%0 Journal Article %T 睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析 %A 戴艺民 %A 周以飞 %A 陈建秋 %A 林江波 %A 张剑亮 %A 林龙云 %A 潘大仁 %J 农业生物技术学报 %P 707-712 %D 2010 %X ?摘要本研究根据同源重组原理,利用电穿孔法将重组质粒pktac1-act1和pktac1-act2分别转化睾丸酮丛毛单胞菌(comamonastestosteroni),经pcr和southernblot筛选获得2株睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌。对这两株基因工程菌的关键酶3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-hydroxysteroiddehydrogenase/carbonylreductase,3α-hsd/cr)表达情况和细菌稳定性的分析结果表明:两株基因工程菌在没有诱导剂诱导的情况下,其3α-hsd/cr的表达量比原始菌提高了近20倍。添加抗生素进行培养,两株工程菌的activator和3α-hsd/cr表达均较稳定;而在不添加抗生素的培养基上培养时,两株工程菌的activator和3α-hsd/cr的表达变化较大,蛋白总体表达水平比添加抗生素时低。研究结果可以初步推断,3α-hsd/cr的表达受activator基因的表达调控。 %K 睾丸酮丛毛单胞菌 %K 3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-hsd/cr) %K activator %K 工程菌 %K 稳定性 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9559.shtml