%0 Journal Article %T 松毛虫dna的提取及issr反应体系的建立 %A 高立杰 %A 高宝嘉 %J 农业生物技术学报 %D 2007 %X ?为摸索适宜松毛虫的issr体系,以油松毛虫为实验材料,研究了issr技术中pcr反应体系的主要成分对issr扩增结果的影响。对issr反应体系中mg2+的浓度、引物浓度、dntp浓度、tagdna聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合松毛虫的issr反应体系为:在25μl反应体系、mg2+、引物和dntp的最适浓度分别为2.5mmol.l-1、0.8μmoll-1、0.20mmol.l-1;反应体系中tagdna聚合酶宜加入1.25u,模板dna应加入15~30ng;引物的最佳退火温度为45.9~52.4℃。并利用该反应体系对14个地区的5种松毛虫进行issr反应,用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测,谱带多态性丰富,清晰稳定,证实该体系稳定可靠。 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8876.shtml