%0 Journal Article %T 加强psy基因表达和通过rnai抑制lcy基因表达的载体构建 %A 万群 %J 农业生物技术学报 %D 2007 %X ?通过基因工程手段加强八氢番茄红素合成酶(psy)基因的表达和通过rnai抑制番茄红素β-环化酶(lcy)基因(该基因是调控番茄红素转化为其他类胡萝卜素的主要的基因)的表达是培育高番茄红素品种的重要手段之一。根据genbank中拟南芥的psy基因序列(nm-121729),通过聚合酶链式反应(pcr)从拟南芥的cdna中扩增出了长1296的psy基因。根据genbank中番茄的lcy基因序列(x86452)和pds启动子序列(u46919)分别设计特异引物从番茄中扩增出了lcy基因的高度保守的长302bp的dna片段和长1790的pds启动子片段。根据rnai的原理,将lcy基因的长302bp的dna片段以正反两个方向通过一段内含子序列连接在一起形成rnai片段插入到抗kan的pvct2020的表达载体中,并通过具有果实特异性特点的启动子——八氢番茄红素去饱和酶基因(pds)启动子控制该干扰片段的表达,同时将psy基因在pds启动子调控下插入到同一载体中,从而构建成了能同时加强psy基因的表达和抑制lcy基因表达的植物表达载体。 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9093.shtml