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草鱼leptin基因的分离鉴定及在巴斯德毕赤酵母中的表达
%A 戴汉川 %A 伍晓雄 %A 聂芬 %A 赵娜 %A 张维民 %A 曾翠平 %A 龙良启 %J 农业生物技术学报 %P 646-651 %D 2006 %X ?利用rt-pcr技术扩增出草鱼(ctenopharyngodonidellus)的leptin基因,将leptin基因克隆至真核表达载体ppic9k,电穿孔转化gs115菌株,经g418筛选和甲醇诱导后,对表达产物进行sds-page琼脂糖凝胶电泳和westernblot分析。结果表明,草鱼leptin基因cdna序列由438个核苷酸组成,编码146个氨基酸组成的多肽(genbank登陆号ay551335),与鲤鱼(cyprinuscarpio)leptin基因相比,核苷酸和氨基酸的同源性为99%;与人、猪和鼠相比,核苷酸同源性分别为84%、86%和95%,氯基酸的同源性分别为84%、82%和96%;与河豚(takifugurubripes)相比,氨基酸具有较大的差异,仅有9%的同源性,表明leptin在物种的进化上具有一定的差异;实现了草鱼leptin基因在毕赤酵母(pichiapastoris)中的表达,表达蛋白的分子量约为16kd,westernblot分析表明,表达产物具有一定的免疫学活性。 %K 草鱼 %K 草鱼leptin基因 %K 毕赤酵母表达 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10100.shtml