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苏云金芽孢杆菌3’端缺失的vip3a基因在大肠杆菌中的表达

%A 师永霞 %A 徐炜 %A 袁美妗 %A 孙钒 %A 庞义 %J 农业生物技术学报 %P 0-626 %D 2006 %X ?将苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)缺失c端154个氨基酸编码区的vip3a基因(vip3t)插入原核表达载体pqe30,构建了重组表达载体pqevip3t,并转化大肠杆菌(escherichiacoli)m15进行iptg诱导表达,比较了完整的vip3a蛋白和c端缺失的蛋白vip3t的可溶性和杀虫活性。与vip3a不同,融合蛋白vip3t以不可溶的包含体形式存在,诱导表达的菌液中没有检测到可溶性vip3t蛋白。生物测定结果表明,m15(potp)诱导表达的vip3a蛋白对初孵斜纹夜蛾(spodopteralitua)和甜菜夜蛾(s.exigua)幼虫具有较高的杀虫活性,其提纯的包含体无毒,但包含体的碱性裂解液却又恢复了对夜蛾科害虫的活性;m15(pqevip3t)菌液、包含体及其碱性裂解液对这两种昆虫幼虫则完全无毒,说明在大肠杆菌中,vip3a蛋白c端氨基酸可能对vip3a蛋白的可溶性和杀虫活性具有重要的影响。 %K 苏云金芽孢杆菌 %K 大肠杆菌 %K vip3a基因 %K 表达 %K 杀虫毒力 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8185.shtml