%0 Journal Article %T 嗜热子囊菌光孢变种cbh1基因的cdna克隆及在毕赤酵母的高效表达 %A 陈静 %A 李多川 %A 张玉芹 %A 杜欣可 %J 农业生物技术学报 %P 345-348 %D 2006 %X ?以嗜热子囊菌光孢变种(thermoascusaurantiacusvar.levisporus)总rna为模板,通过rt-pcr克隆出外切纤维二糖水解酶基因cbh1片段,采用race方法获得全长cdna克隆,其全长为1710bp,编码一种由457个氨基酸组成的单肽,推导的氨基酸序列中1~19位为信号肽序列,genbank的登录号为ay840982。将该片段克隆到毕赤酵母(pichiapastoris)分泌型表达载体ppic9k上,获得表达重组质粒ppic9k/cbh1,转化毕赤酵母gs115,所得重组子经pcr验证后进行诱导表达,筛选出一重组子gsp-15,经144h诱导后,外切纤维二糖水解酶表达量为1.17mg/ml,产酶活力为20.3u/ml。 %K 嗜热子囊菌光孢变种 %K 外切纤维二糖水解酶 %K cdna克隆 %K race %K 毕赤酵母 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10019.shtml