%0 Journal Article
%T 胚柄特异性表达顺式元件结合蛋白酵母单杂交文库的构建
%A 宋国琦
%A 王兴军
%A 赵传志
%A 夏晗
%J 农业生物技术学报
%P 849-855
%D 2011
%X ？旨在构建酵母单杂交文库用于筛选与胚柄特异基因g564启动子顺式元件结合的转录因子。本研究根据植物胚柄特异表达基因g564启动子关键序列(gaaaagcgaa)合成了5次串联重复序列，并与报告质粒phis2.1连接构建诱饵载体phis2.1-g564-5a；以纯化的拟南芥(arabidopsisthaliana)幼嫩种子mrna为模板，合成smarttmⅲ和cdsⅲ锚定末端dscdna；并将dscdna与线性化融合表达载体pgadt7-rec2以及诱饵载体phis2.1-g564-5a共转化到酵母y187，构建酵母单杂交文库。文库的共转化效率为5.53×105cfu/μg。对文库中的阳性克隆进行测序，获得117条可读序列。对其进行基因功能注释并进一步分析基因的功能发现，具有dna结合功能的蛋白14个，具有蛋白质结合功能的蛋白8个。上述22个蛋白包括tata结合蛋白1(tbp1)，支架结构相关区(sar)dna-结合蛋白，胚珠发育蛋白，g-box结合因子1(gbf1)，组蛋白h3等。本研究为分离和克隆胚柄中特异表达的转录因子提供了候选基因。
%U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9112.shtml