%0 Journal Article %T 小金海棠质膜h+-atpase基因(mxha2)的克隆及功能分析 %A 槐心体 %A 王忆 %A 张倩 %A 张新忠 %A 韩振海 %J 农业生物技术学报 %P 1097-1105 %D 2012 %X ?植物质膜h+-atpase能把质子泵出根外酸化土壤,增加铁的溶解度,利于植物对铁的吸收。小金海棠是一个苹果铁高效基因型砧木,为研究质膜h+-atpase在小金海棠铁吸收过程中的功能,本研究通过同源克隆的方法从小金海棠(malusxiaojinensis)中克隆到了一条全长2865bp含有完整编码区的质膜h+-atpase基因(mxha2),编码954个氨基酸(genbank登录号:jq867095)。系统进化分析结果表明mxha2蛋白与碧桃(prunuspersica)的ppa2蛋白亲缘关系较近。基因枪法在洋葱(alliumcepa)表皮内进行亚细胞定位分析,结果表明,mxha2与gfp的融合蛋白定位于细胞膜上。荧光定量pcr分析表明,缺铁胁迫后,mxha2基因在根和叶中均有不同程度的增强。把mxha2基因转化到酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)(bj2168)后,转mxha2的酿酒酵母h+-atpase活性极显著增强,且缺铁处理后其生长量持续高于对照,表明该基因编码的蛋白具有h+-atpase活性,其过量表达能提高酵母菌株的耐缺铁性。结果提示,mxha2可能在小金海棠的耐缺铁胁迫过程中起重要作用,为进一步研究小金海棠的铁高效机理提供了依据,在果树耐缺铁分子育种上有重要的应用前景。 %K 小金海棠 %K 缺铁胁迫 %K 表达分析 %K 亚细胞定位 %K 酵母转化 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8812.shtml