%0 Journal Article %T 环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立 %A 李明云 %A 丁文超 %A 陈炯 %A 史雨红 %J 农业生物技术学报 %P 85-92 %D 2011 %X ?dna环介导恒温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,lamp)技术是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术,其检测结果可以通过琼脂糖凝胶电泳观察,也可以通过加入核酸染料sybrgreenⅰ进行肉眼观察。本研究根据对虾白斑综合征病毒(whitespotsyndromevirus,wssv)的结构蛋白vp26基因序列,设计一套引物,成功建立了针对wssv的lamp检测方法。应用该方法,在65℃温育1h的条件下快速扩增病毒基因组dna,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带;在反应体系中添加sybrgreenⅰ染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。该研究建立的lamp法能特异性检出wssv,其检测下限比pcr法低一个数量级,相当于0.563pg/μl的质粒(pmd19-t-vp26)浓度。表明所建立的wssvlamp检测法特异性好、灵敏度高、操作简单方便,有望作为wssv快速诊断的常规方法。 %K 对虾白斑综合征病毒 %K vp26基因 %K 环介导恒温基因扩增检测技术 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8330.shtml