%0 Journal Article %T 环状芽孢杆菌乳糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质分析 %A 王元火 %A 姚斌** %A 袁铁铮 %A 操时树 %A 张伟 %A 王亚茹 %A 范云六 %J 农业生物技术学报 %P 30-33 %D 2003 %X ?:将环状芽孢杆菌(bacilluscirculans)中的乳糖酶基因在大肠杆菌(escherichiacoli)中进行了高效表达,并测定了表达的乳糖酶的基本酶学性质。结果表明,表达的乳糖酶有生物学活性,但与来源于环状芽孢杆菌的原始酶相比,其酶促反应的最适ph、最适温度、km值,以及酶的ph稳定性和温度稳定性等酶学性质均有较大变化。表达的乳糖酶最适ph为5.0,低于原始酶的ph6.5;最适温度为37℃,而原始酶为55℃;其耐酸性、耐热性及对金属离子的抗性等方面比原酶有所提高;而且表达的乳糖酶km比原始酶小285倍、vmax比原始酶大5.4倍,表明经大肠杆菌表达的乳糖酶有较高的底物亲和力,酶促反应效率更高。从乳糖酶的单位表达量来看,原始酶在环状芽孢杆菌的表达量为20.98u/ml,而在大肠杆菌中的表达量提高到33.102?u/ml。 %K 关键词:环状芽孢杆菌 %K 乳糖酶 %K 基因表达 %K 酶学性质 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10170.shtml