%0 Journal Article %T 热硫化氢高温厌氧杆菌的ttx31基因克隆、表达与功能分析 %A 杜照奎 %J 农业生物技术学报 %P 272-279 %D 2010 %X ?生物信息学分析发现,热硫化氢高温厌氧杆菌(thermoanaerobacterthermohydrosulfuricus)的?-淀粉酶/普鲁兰糖酶(?-amylase/pullulanase)基因中的一段未知功能序列ttx31可能编码碳水化合物结合结构域(carbohydratebindingmodule,cbm),但其结合特性未知。本实验以t.thermohydrosulfuricus为材料,通过菌落pcr扩增其ttx31序列,将获得的ttx31克隆到表达载体pet22b(+)中得到重组质粒pex31,序列分析表明,所得重组表达载体pex31中的ttx31序列正确。将重组载体pex31转入大肠杆菌宿主表达菌tuner中,iptg诱导表达后纯化,采用sds-page电泳和非变性亲和凝胶电泳法,研究重组表达的目的蛋白ttx31与糖的相互作用。结果发现,ttx31能结合糊精,但不能结合可溶性淀粉、普鲁兰糖、支链淀粉等。实验结果可以认为ttx31是一种功能性的新碳水化合物结合结构域,可以结合糊精。 %K 热硫化氢高温厌氧杆菌 %K 碳水化合物结合结构域 %K 菌落pcr %K 糊精结合结构域 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9032.shtml