%0 Journal Article
%T α-半乳糖苷酶基因mel1在毕赤酵母中的组成型表达
%A 张学文
%A 唐香山
%A 张金谌
%A 章怀云
%J 农业生物技术学报
%P 197-202
%D 2006
%X ？用pcr方法从酵母(saccharomyces？cerevisiae？)？ah109中扩增出α-半乳糖苷酶的mel1基因，将其克隆至整合型载体pgapzαa中构建成组成型分泌表达酶产物的重组质粒pgapzα-mel1。将线性化的重组质粒pgapzα-mel1电击转化至毕赤酵母(pichia？pastoris？)？km71，在含有100？mg/ml？zeocin和预先涂布有x-α-gal的ypds平板上选择蓝色阳性菌落。发酵培养酵母的上清经sds-page分析，在53？kd处有特异带；经非变性page凝胶电泳，与显色底物的反应，检测到α-半乳糖苷酶活性带。重组菌pgapzα-mel1？/km71摇瓶发酵6？d后，培养液α-半乳糖苷酶粗酶活性为12？u/ml。
%K α-半乳糖苷酶
%K mel1基因，重组质粒pgapzα-mel1
%K 组成型表达
%U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8961.shtml