%0 Journal Article %T 豇豆胰蛋白酶抑制剂和硫氧还蛋白的融合表达和活性测定 %A 畅文军 %A 王宇光 %A 雷禄旺 %J 农业生物技术学报 %P 174-177 %D 2006 %X ?采用融合蛋白表达技术,通过1个人工设计合成的柔性接头,将豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpeatrypsininhibitor,cpti)基因与表达载体上的硫氧还蛋白(thioredoxin)基因连接,构建了融合表达载体。将表达载体转入大肠杆菌(escherichiacoli)gi724,通过色氨酸诱导获得高效表达,产物以可溶状态存在。活性测定显示,融合蛋白具有抑制胰蛋白酶的生物学活性。以大豆胰蛋白酶抑制剂为参照,将融合蛋白热处理后进行活性测定,发现它具有较好的热稳定性。将肠激酶(enterokinase)与融合蛋白在37℃作用16h,可获得切掉thioredoxin的cpti蛋白。活性测定显示,切除thioredoxin后cpti的胰蛋白酶抑制活性比同样处理条件下的thioredoxin-cpti明显下降,比活力仅为原来的80%,说明融合蛋白具有更高的稳定性。研究结果为thioredoxin-cpti作为一种生物农药的应用奠定了基础。 %K 豇豆胰蛋白酶抑制剂 %K 硫氧还蛋白 %K 结构设计 %K 融合蛋白表达 %K 生物农药 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8192.shtml