%0 Journal Article
%T 麻鸭白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆、表达及生物学活性
%A 陈红英
%A 夏平安
%A 李新生
%A 杨明凡
%A 郑兰兰
%A 崔保安
%J 农业生物技术学报
%D 2007
%X ？根据genbank发表的鸭il-18cdna基因序列，设计、合成一对引物，直接从成年麻鸭脾淋巴细胞提取总rna，经反转录-聚合酶链反应（rt-pcr）扩增麻鸭il-18成熟蛋白基因，扩增产物进行了t-a克隆、测序，获得了麻鸭il-18成熟蛋白基因全序列，其大小为513bp，编码一条由170个氨基酸残基组成的多肽。将该基因片段亚克隆到原核表达载体pqe30，构建重组表达质粒pqe30-mduil18，转化大肠杆菌m15，并用iptg诱导。重组菌菌体裂解物经sds-page可检测到相对分子质量为19.76ku的重组蛋白，westernblotting证实该重组蛋白可与兔抗鸡il-18血清发生特异性反应。表达产物以包涵体形式存在，包涵体经变性、复性处理后进行鸭t淋巴细胞转化试验表明，重组蛋白具有明显促进鸭t细胞转化的生物学活性。用mduil-18（150ngor200ng/鸭）和aiv疫苗免疫鸭2周后，hi抗体平均滴度达到7.5–7.7log2，而只用aiv疫苗免疫和用mduil-18（100ng/鸭）和aiv疫苗免疫的hi抗体平均滴度仅达到6.3–6.6log2，表明mduil-18提高aiv灭活油乳苗诱导的免疫应答。这为研究鸭il-18结构和生物学应用，以及研制新型免疫佐剂和免疫调节剂奠定基础。
%U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract8139.shtml