%0 Journal Article %T 犬白细胞介素2在毕赤酵母中的诱导表达及生物活性的测定 %A 朱骞 %A 张汇东 %A 葛菲菲 %A 缪勤 %A 曹瑞兵 %A 陈溥言 %A 徐汉坤 %J 农业生物技术学报 %D 2007 %X ?以cona刺激的犬外周血淋巴细胞总rna为模板,通过rt-pcr方法扩增出犬il-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pmd18-t载体,测序结果显示,扩增片段与genbank上发表的序列一致。然后将目的片段连接到酵母表达载体ppicza-a上,得到重组酵母犬il-2表达载体ppiczaa-cail-2,经sacⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株x-33。pcr方法筛选重组酵母菌,甲醇诱导表达,sds-page结果显示表达上清中有大小约20kda的目的条带,比实际分子量略大,推测蛋白可能发生糖基化。mtt法测定生物学活性结果表明,重组犬il-2能够极显著促进犬外周血淋巴细胞增殖。证明酵母表达的犬重组il-2具有良好的生物学活性。 %K 犬 %K il-2基因 %K 毕赤酵母 %K 诱导表达 %K 生物学活性 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9098.shtml