%0 Journal Article %T 甘蔗抗坏血酸过氧化物酶基因(scapx)的克隆及表达分析 %A 王竹青 %A 陈云 %A 杨玉婷 %A 苏亚春 %A 陈珊珊 %A 吴期滨 %A 许莉萍 %J 农业生物技术学报 %P 141-150 %D 2015 %X ?抗坏血酸过氧化物酶(ascorbateperoxidase,apx)是清除活性氧(reactiveoxygenspecies,ros)的重要酶类。本研究对针刺接种黑粉菌(sporisoriumscitamineum)后的抗、感基因型甘蔗(saccharumofficinarum)进行apx活性测定。结果表明,甘蔗接种黑穗病菌48h内,抗病品种(崖城05-179)apx活性显著高于感病品种(柳城03-182)(p<0.05)。借助电子克隆技术,结合rt-pcr方法,从甘蔗中分离到一个apx基因,并命名为scapx(genbank登录号:kj7565501)。生物信息学分析显示,scapx基因全长1171bp,包含一个1038bp的完整开放阅读框,编码345个氨基酸。scapx编码的蛋白不含信号肽,推测其为非分泌蛋白,定位于线粒体基质和叶绿体基质中的概率分别为91.1%和88.7%。实时荧光定量pcr检测结果显示,scapx在甘蔗根、芽、叶、蔗皮和蔗髓中均有表达,为组成型表达基因,表达量在蔗皮中最高,叶中最低,前者是后者的19.7倍;在外源因子处理后0~48h,scapx基因的表达受水杨酸(salicylicacid,sa)、茉莉酸甲酯(methyljasmonate,meja)、过氧化氢(hydrogenperoxide,h2o2)、脱落酸(abscisicacid,aba)、氯化钠(sodiumchloride,nacl)和聚乙二醇(polyethyleneglycol,peg)诱导,sa、meja和h2o2处理后的scapx转录本积累量峰值较外源激素(aba)和环境(nacl和peg)胁迫早。前者的scapx转录本变化呈现出胁迫初期积累量增加,达到峰值后又逐步下降的特点;在同样的测试时间(处理后24h)内,aba、nacl和peg处理后scapx转录本在达到峰值后未见下降。虽然在外源胁迫下,scapx表达量变化存在明显差异,但其表达均表现出正响应上述外源因子对甘蔗的胁迫。本研究为后续深入鉴定该基因的功能与进一步应用提供基础资料。 %K 甘蔗 %K 甘蔗黑穗病菌 %K 抗坏血酸过氧化物酶基因(scapx) %K 非生物胁迫 %K qrt-pcr %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10232.shtml