%0 Journal Article
%T 利用不同基因转移方法构建转基因红鲤
%A 汤泽源
%A 薛良义
%A 胡铭炎
%J 农业生物技术学报
%P 1-11
%D 2013
%X ？本实验研究了大黄鱼肌肉生长抑素前肽基因对红鲤的促生长作用。分别通过rt-pcr和pcr从大黄鱼(larimichtyscrocea)和pires-egfp质粒扩增得到了肌肉生长抑素(mstn)前肽基因及核糖体内部进入位点序列(ires)-增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)片段，经测序验证正确后，构建了tol2转座子供体质粒pt2al200r150g-mstnpropeptide-ires-egfp。通过精子介导法(s1、s2组)、电穿孔法(e1、e2组)及基因枪法构建转基因红鲤(cyprinuscarpio)，孵化72h后的鱼苗经荧光显微镜检测，egfp表达阳性率为：精子介导法s1组38%，精子介导法s2组48%，电穿孔e1组47%，电穿孔e2组53%，基因枪组2%；孵化10d的仔鱼rt-pcr检测egfp和mstn前肽基因阳性率为：精子介导法s1组35%，精子介导法s2组45%，电穿孔e1组45%，电穿孔e2组55%，基因枪组1.8%。孵化后75d转基因红鲤与对照组相比，体长和体重分别提高了21.31%和27.59%。本实验结果表明，精子经高渗、低渗保存剂处理并通过电穿孔作用可大幅提高基因转移效率。
%K tol2
%K 大黄鱼肌肉生长抑素前肽
%K 转基因
%K 生长
%U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9214.shtml