%0 Journal Article %T 牛白介素32基因可变剪接体(il-32γ)的分子克隆及功能验证 %A 魏育蕾 %A 程祥 %A 杨藩 %A 张军林 %A 王华岩 %J 农业生物技术学报 %P 1-11 %D 2013 %X ?牛白细胞介素32(interleukin-32,il-32)基因是近年发现的一种新型功能基因,是一种炎症性细胞因子,其主要作用是诱导其他细胞因子和化学因子的产生,并在自身免疫性炎症性疾病中发挥重要作用,可促进细胞凋亡,从而抑制结核分支杆菌(mycobacterium)等多种分支杆菌感染,提高动物机体抗病能力。本研究从秦川牛(bostaurus)脾脏组织中分子克隆了牛il-32β基因及其可变剪接体il-32γ基因,经序列分析表明,该基因定位于牛25号染色体上,实验克隆的牛il-32β基因与ncbi中已发表序列有5个碱基不同,通过蛋白二级序列比较,该差异并不影响蛋白的折叠,推测这几个碱基差异是秦川黄牛il32基因的snp。il-32γ比il-32β序列多了第二内含子,导致编码序列多编码47个氨基酸。为了研究该可变剪接体的功能,本研究构建了真核表达载体pires-il32γ-gfp。将该载体稳定转染小鼠(musmusculus)巨噬细胞raw264.7,获得超表达牛il-32γ基因的小鼠巨噬细胞,同时以稳定转染人il-32γ基因的小鼠巨噬细胞为阳性对照,real-timepcr检测表明,超表达牛il-32γ具有调节il-1β、il-6、mip2、tnfα等细胞因子的功能,其趋势与阳性对照人il-32γ的趋势相近。本实验研究为进一步研究牛il-32γ基因生物学功能打下了基础。 %K 牛 %K 白细胞介素32(il-32) %K 分子克隆 %K 巨噬细胞 %K 肿瘤坏死因子(tnfα) %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9204.shtml