%0 Journal Article %T 番茄不孕病毒bj株系基因组测定与侵染性克隆 %A 施伟 %A 金圣塔 %A 张海峰 %A 王婷 %A 陈集双 %A 廖乾生 %J 农业生物技术学报 %P 1042-1050 %D 2011 %X ?番茄不孕病毒(tomatoaspermyvirus,tav)可侵染包括藜科(chenopodiaceae)、茄科(solanaceae)等在内的24个双子叶家族和3个单子叶家族的100多种植物,是具有重要经济价值的植物病毒之一。为研究tavbj株系(tomatoaspermyvirus,tav-bj)的基因组功能,本实验对tav-bj基因组克隆测序,并构建侵染性克隆。以tav-bj侵染心叶烟(nicotianaglutinosa)的总rna为模板,rt-pcr获得其rna2和rna3;以tav-bj的dsrna为模板,rt-pcr获得全长rna1,目的片段pcr产物克隆测序获得tav-bj基因组全序列信息。rna1全长3409nt,编码994个氨基酸的1a蛋白;rna2全长3023nt,含2个开放阅读框(openreadingframe,orf),2aorf编码829个氨基酸的2a蛋白,2borf编码78个氨基酸的2b蛋白;rna3全长为2216nt,包含2个orf,3aorf编码247个氨基酸的3a蛋白,外壳蛋白(coatprotein,cp)orf编码219个氨基酸的cp蛋白(tav-bj基因组rna1、2和3genbank登录号分别为hq424163,hq424164和hq424165)。tav-bj基因组cdna克隆体外转录成rna并接种于心叶烟上,结果表明转录产物在寄主上的症状反应和tav-bj病毒粒子rna的接种相一致,tav-bj基因组cdna侵染性克隆具有活性。由tav-bj各个基因片段与缺失2b基因的黄瓜花叶病毒fny株系(cucumbermosaicvirus,cmv-fnyδ2b)构建的假重组病毒接种于心叶烟,结果显示tav-bj的rna2和rna3能恢复cmv-fnyδ2b在寄主上症状反应。嵌合型rna3f3atcp和rna3t3afcp的症状反应结果表明,f1f2δ2brna3t3afcp在寄主上产生花叶症状与f1f2δ2bt3相一致。本研究获得tav-bj的基因组序列,成功构建侵染性克隆,同时发现tav-bj的3a基因具有cmv-fny的2b基因的某些功能。 %K 番茄不孕病毒 %K 基因组序列 %K 侵染性克隆 %K 3a基因 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9471.shtml