%0 Journal Article
%T 大黄鱼wap65-2基因的分子鉴定及其与溶藻弧菌感染的相关性分析
%A 李长红
%A 杨智景
%A 李明云
%A 陈炯
%J 农业生物技术学报
%P 579-587
%D 2015
%X ？wap65-2(warmtemperatureacclimationrelated65kdprotein-2)是在硬骨鱼类中发现的一种血浆糖蛋白，与细菌感染引起的免疫应答密切相关。本研究通过大黄鱼(larimichthyscrocea)肝组织转录组测序获得了大黄鱼lcwap65-2基因全长cdna(genbank登录号:kj412463)。结果表明，lcwap65-2基因由1585个核苷酸组成，包含一个大的开放阅读框，编码432个氨基酸，预测分子量为48.84kd，等电点为5.36，n末端20个氨基酸为信号肽。氨基酸序列多重比对分析表明，lcwap65-2具有鱼类wap65-2的典型结构特征，lcwap65-2与鮸鱼(miichthysmiiuy)wap65-2同源性最高(87.4%)；系统进化树分析表明，鱼类wap65-2形成一个大簇，lcwap65-2与鮸鱼wap65-2进化相关性最高。基因组结构分析表明，lcwap65-2基因组dna序列(genbank登录号:kj412464)由10个外显子和9个内含子组成。实时荧光定量pcr(real-timequantitativepcr,qrt-pcr)结果显示，lcwap65-2mrna主要在健康大黄鱼肝组织中表达，在脑中有少量表达；溶藻弧菌(vibrioalginolyticus)感染后大黄鱼肝组织中lcwap65-2mrna表达量显著上调(p＜0.05)，在感染8h时达到峰值。原核表达大黄鱼wap65-2成熟肽(lcwap65-2m)，并制备了抗血清，westernblot分析表明，溶藻弧菌感染后大黄鱼血清wap65-2表达量在4h时无明显变化，8h后显著上调(p＜0.05)。大黄鱼wap65-2基因及蛋白的表达与溶藻弧菌感染过程紧密相关，揭示其可能在鱼类抗感染免疫应答中发挥重要作用。研究结果为进一步研究鱼类wap65-2的功能及其在病原菌感染免疫中的分子机制提供基础资料。
%K wap65-2
%K 大黄鱼
%K 溶藻弧菌
%K 基因表达
%K 系统发育树分析
%U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10259.shtml