%0 Journal Article %T 细胞分裂周期蛋白2启动子报告基因载体的构建与鉴定 %A 周辉 %A 吴炜 %A 赵明 %J 天津医药 %D 2014 %X ?目的:构建细胞分裂周期蛋白2cdc2基因启动子荧光素酶报告基因载体pgl3-cdc2-promoter,并检测其转录活性。方法:根据ucsc软件查找的人基因组dna的cdc2启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组dna中的cdc2启动子。用限制性内切酶scaⅰ和xhoⅰ双酶切质粒pgl3-basic和cdc2启动子后,将cdc2基因启动子插入到pgl3-basic报告基因载体上。重组质粒命名为pgl3-cdc2-promoter。将其与内参质粒prl-sv40瞬时共转染骨肉瘤细胞u2os,检测双荧光素酶活性。结果:成功构建cdc2基因启动子荧光素酶报告基因载体pgl3-cdc2-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时转染实验显示,cdc2启动子具有转录活性,pgl3-cdc2-promoter的荧光素酶水平约是pgl3-basic的32倍。结论:pgl3-cdc2-promoter在骨髓瘤细胞u2os细胞中能被转录激活,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。 %K 细胞分裂周期蛋白2 %K cdc2 %K 细胞周期素依赖性激酶1 %K cdk1 %K 细胞周期 %K 启动子 %K 双荧光素酶 %U http://60.30.86.82:10080/Jwk_tjyy/CN/abstract/abstract7817.shtml