%0 Journal Article %T 人nanog-delta48基因的克隆及其真核表达载体的构建 %A 邓璐林 %A 章诺贝 %A 张吉翔 %J 天津医药 %D 2012 %X ?:目的:构建pcdna5/frt-nanog-delta48真核表达载体,检测其在肝癌细胞7721中的表达。方法:通过rt-pcr的方法克隆nanog基因的剪切变异体nanog-delta48全长编码序列,连接入pmd18-t载体,经鉴定正确后亚克隆入pcdna5/frt,构建pcdna5/frt-nanog-delta48真核表达载体,测序无误后经脂质体介导转染转染到肝癌细胞7721中,通过rt-pcr初步鉴定其在7721细胞中的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(mtt)法检测转染前后的细胞增殖活力。结果:成功克隆nanog-delta48基因全长编码区,测序证明pcdna5/frt-nanog-delta48重组真核表达载体成功,使其在7721细胞中过表达,mtt检测nanog-delta48转染入7721细胞后,增值能力增强。结论:剪接变异体nanog-delta48基因可能具有与nanog基因类似的活性,将为进一步研究nanog-delta48基因的功能以及与nanog基因的关系及奠定基础。 %K 人 %K nanog %K 剪接变异体 %K 基因克隆 %K 真核表达 %K 瞬时转染 %U http://60.30.86.82:10080/Jwk_tjyy/CN/abstract/abstract7607.shtml