%0 Journal Article %T 人脐带血造血干细胞体外分化为nk细胞的效率及功能检测 %A 罗琦 %A 尹洁 %A 李杨 %A 黄珊 %A 王玺 %A 何景华 %J 天津医药 %P 225-228 %D 2015 %X ?目的检测人脐带血造血干细胞(hscs)体外分化为自然杀伤(nk)细胞的效率及功能。方法从人脐带血中分离cd34+hscs,接种于含20μg/lfms样酪氨酸激酶3配体(flt3l)、干细胞生长因子(scf)、白细胞介素(il)-7、il-15及il-21的scgm培养基中,定向诱导cd34+hscs分化为nk细胞。观察细胞生长状态,在分化的第7、14、21及28天,采用流式细胞术检测各阶段cd56、nkg2d、nkp46、cd3、cd19及cd34等细胞免疫表型的表达变化;分化的第21、28天,以分化得到细胞为效应细胞,k562细胞作为靶细胞,设置8∶1、4∶1、2∶1和1∶14组效靶细胞比,分别采用乳酸脱氢酶(ldh)细胞毒性检测法和7aad/cfse标记法,检测分化得到的细胞杀伤功能。结果脐带血来源的cd34+hscs在体外适宜的条件下可大量增殖;整个分化进程的不同阶段中,cd3和cd19表达量差异无统计学意义,cd56、nkg2d及nkp46的表达量逐渐增加,最高达(72.57±1.60)%、(32.83±1.29)%和(29.53±2.40)%,cd34的表达量逐渐降低,最低为(12.13±2.01)%。ldh毒性检测法和7aad/cfse标记法测得最大杀伤效率可达(49.91±2.76)%和(40.87±1.12)%,8∶1、4∶1、2∶1和1∶1组nk细胞杀伤能力均依次降低(p<0.05),诱导分化28d的nk细胞杀伤能力与21d差异无统计学意义。结论人脐带血hscs在体外适宜的培养条件下,可定向分化为nk细胞,诱导分化得到的nk细胞具有杀伤功能。 %K 胎血 %K 造血干细胞 %K 杀伤细胞 %K 天然 %K 免疫表型分型 %K 细胞毒性试验 %K 免疫 %K cd34+hscs %K 体外分化 %K 细胞杀伤 %U http://60.30.86.82:10080/Jwk_tjyy/CN/abstract/abstract9240.shtml