%0 Journal Article %T 猪传染性胃肠炎病毒msm基因重组杆状病毒的构建及病毒样颗粒的组装 %A 冷勇 %A 宋振辉 %A 卿家超 %A 翟少华 %A 买买提·艾孜子 %J 牲畜兽医学报 %P 1432-1437 %D 2013 %X ?利用rt-pcr方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(tgev)m和sm结构蛋白基因,将其分别克隆入载体pfastbactmdual,获得转移质粒pfastbactmdual-m和pfastbactmdual-m-sm,将重组质粒转化至dh10bac感受态细胞,经抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒bacmid-m和bacmid-m-sm,在cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rbac-m和rbac-m-sm。通过westernblot、间接免疫荧光试验(ifa)进行检测,结果显示:重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。将重组杆状病毒rbac-m和rbac-m-sm分别感染sf9昆虫细胞,进行tgev病毒样颗粒(vlps)的体外组装试验。结果表明,m蛋白在sf9细胞内单独表达,m蛋白和sm在sf9细胞内共同表达,都可形成tgev病毒样颗粒,而且病毒粒子大小不等,直径在61~101nm。试验结果为进一步研究tgev结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据。 %K 猪传染性胃肠炎病毒(tgev) %K m基因 %K sm基因 %K sf9细胞 %K 病毒样颗粒 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13024.shtml