%0 Journal Article %T 犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究 %A 乔军 %A 夏咸柱 %A 杨松涛 %A 郝峰 %A 高玉伟 %A 郑晓一 %A 黄耕 %J 牲畜兽医学报 %P 412-416 %D 2006 %X ?以pvax1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(ccvdxmv)纤突蛋白(s)、膜蛋白(m)和核蛋白(n)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pts、ptm和ptn分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pvax1中得到重组质粒pvaxs、pvaxm和pvaxn。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染mdck细胞,通过rtpcr法进行转录水平的检测,并用间接elisa法检测目的蛋白的表达情况。结果在pvaxs、pvaxm、pvaxn转染mdck细胞36h后就可检测到目的基因的转录;在转染72h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为ccv基因疫苗的研究奠定了良好的基础。 %K 犬冠状病毒 %K 基因疫苗表达载体 %K 构建 %K 免疫原性 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract8561.shtml