%0 Journal Article %T 绵羊肌肉抑制素c端的表达、纯化及多克隆抗体的制备 %A 马毅 %A 舒建洪 %A 李晴 %A 关宏 %A 安晓荣 %A 陈永福 %J 牲畜兽医学报 %P 1253-1257 %D 2009 %X ?为深入了解绵羊myostatin基因的表达及调控机理,进行了绵羊myostatin蛋白多克隆抗体的制备。首先将绵羊myostatin基因c端克隆入含组氨酸标签的表达载体pet30ac(+)中,转化大肠杆菌bl21后iptg诱导表达,然后利用ni2+亲和层析纯化重组蛋白,薄层扫描及bradford法分别检测纯化后蛋白的纯度与含量。应用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,利用间接elisa法检测多克隆抗体效价,用westernblot及免疫细胞化学染色检测抗体特异性。结果,薄层扫描分析纯化后蛋白纯度可达95%以上,bradford法检测蛋白浓度约5mg·ml1,制备的抗血清效价可达1∶250000以上,westernblot检测证明抗体特异性良好,免疫细胞化学染色表明抗血清可检测到肌肉细胞中内源性myostatin的表达,说明所制备的多克隆抗体可以应用于进一步研究,有助于阐明绵羊myostatin的表达及调控机理。 %K 绵羊 %K 肌肉抑制素 %K 克隆 %K 原核表达 %K 纯化 %K 多克隆抗体 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract10701.shtml