%0 Journal Article %T 快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重pcr方法 %A 戈胜强 %A 柴同杰 %A 马保臣 %A 李晓霞 %A 蔡玉梅 %A 吕静 %A 秦梅 %A 王炳晓 %J 牲畜兽医学报 %P 1554-1561 %D 2008 %X ?综合多种细菌、真菌dna模板的提取方法,采用β巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的dna,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法。建立双重pcr方法,同时完成对细菌16srrna保守区特异性基因片段和真菌18srrna保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染。对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重pcr方法对比鉴定。结果表明,双重pcr检测乳样细菌的最小浓度为102cfu/ml,检测乳样真菌的最小浓度为103cfu/ml。双重pcr方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(p>0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(p<0.01)。 %K 奶牛乳腺炎 %K 细菌 %K 真菌 %K 双重pcr %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract9284.shtml