%0 Journal Article %T 小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用 %A 龙云凤 %A 周晓黎 %A 杨俊兴 %A 王琼 %A 祝贺 %A 叶玲玲 %A 董俊 %A 吕建强 %A 王金萍 %A 陈朝银 %A 花群义 %A 杨仕标 %A 尹尚莲 %A 徐维佳 %A 艾军 %J 牲畜兽医学报 %P 588-595 %D 2012 %X ?针对小反刍兽疫病毒核蛋白制备特异性的单克隆抗体,并对其进行生物学特性鉴定和初步应用。以纯化的bacmidpprvn重组蛋白为抗原免疫balb/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞在peg作用下融合,获得单克隆抗体,并通过染色体技术等方法研究其生物学特性,将其作为竞争单抗,bacmidpprvn重组蛋白作为检测抗原建立竞争elisa检测方法。结果表明:经克隆和间接elisa筛选,获得了2株能稳定分泌抗小反刍兽疫病毒n蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5b11和3h103b8。生物学特性鉴定试验表明:5b11和3h103b8抗体类型和亚类均为igg2b;5b11单抗腹水的效价达1∶819200,3h103b8达1∶12800;血清学试验证明2株单抗均能与bacmidpprvn重组蛋白抗原结合,具有高度的特异性;相加elisa试验结果显示,5b11和3h103b82株单克隆抗体分别识别n蛋白上不同的抗原位点;2株杂交瘤细胞的染色体均为99~104。应用建立的celisa检测方法对222份血清样品进行pprv抗体的检测,与参考试剂盒比较得到98.20%的符合率。本研究获得了2株能稳定分泌抗pprvn蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以单抗5b11作为竞争抗体建立了pprv的celisa检测方法。 %K 小反刍兽疫 %K 单克隆抗体 %K 生物学特性 %K 竞争elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12623.shtml