%0 Journal Article %T 菌丝霉素的串联表达及其菌内抑菌活性分析 %A 管韬 %A 余冰 %A 陈代文 %A 韩国全 %A 黄志清 %A 毛湘冰 %A 郑萍 %A 毛倩 %J 牲畜兽医学报 %P 620-626 %D 2012 %X ?构建菌丝霉素(plectasin,pt)的串联表达菌株,研究各串联体融合表达产物的菌内抑菌活性。根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏爱性,人工合成优化后pt基因,构建表达质粒pgexpt/pe;并利用同尾酶法分别构建pt基因二聚体表达质粒pgexpt/pes2与pt基因三聚体表达质粒pgexpt/pes3;然后分别将各表达质粒转化入bl21(de3)进行iptg的诱导表达,对各表达蛋白进行sdspage、westernblot分析,并测定各融合表达产物的菌內抑菌活性。测序结果表明,串联体扩增到产物大小分别为135、261和387bp的目的基因片段;sdspage分析各串联表达菌表达的融合蛋白相对分子质量分别约为30、35和40ku,其产量分别占细菌总蛋白的64.5%、26.4%和25.3%。westernblot分析表明各表达蛋白均具有良好的免疫反应性;菌内抑菌结果显示,各融合表达产物均表现对dh5α的弱抑制作用,但随pt基因串联数的增加,融合表达产物的抑菌效果显著提高,且抑菌时间延长。各串联表达菌株的成功构建与其表达产物的宿主菌抑制作用,为菌丝霉素高效抑菌产品的开发奠定了基础。 %K 菌丝霉素 %K 串联表达 %K 菌內抑菌活性 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12628.shtml