%0 Journal Article %T 猪流行性腹泻病毒n蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析 %A 吕茂杰 %A 冯力 %A 时洪艳 %A 陈建飞 %A 孙东波 %A 申识川 %A 崔小辰 %A 王承宝 %A 范秀萍 %J 牲畜兽医学报 %P 691-696 %D 2009 %X ?以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒cv777株核衣壳蛋白(n)基因的阳性质粒pmdt-18-n为模板,用含有kpnⅰ和xhoⅰ酶切位点的上、下游引物扩增获得n基因,该pcr产物经kpnⅰ和xhoⅰ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcdna3.1(+)中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcdna3.1(+)-n,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcdna3.1(+)-n转染veroe6细胞,在48h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源`多抗血清进行westernblot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析n蛋白的亚细胞定位。结果表明n基因能在真核细胞veroe6中正确表达,共聚焦分析结果表明n蛋白在细胞质和细胞核中定位。 %K 猪流行性腹泻病毒 %K 核衣壳蛋白 %K 真核表达 %K 亚细胞定位 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract8610.shtml