%0 Journal Article %T 猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量pcr检测方法的建立 %A 邓宇 %A 张荣 %A 丛雁方 %A 张建武 %A 袁世山 %A 文心田 %A 郑浩 %J 牲畜兽医学报 %P 1046-1050 %D 2011 %X ?本研究旨在建立一种荧光定量pcr检测方法,用于猪源牛病毒性腹泻病毒(bvdvs)检测,同时能鉴别诊断猪瘟病毒(csfv)。根据bvdvs与csfv5′-utr保守序列,设计一套引物和特异taqman探针,以本实验室构建的猪源bvdvs5′-utr阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线。以构建的标准品为模板进行了特异性、敏感性、重复性试验、并应用于临床检测。结果显示,该方法检测csfv、猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性;最低可检测到每个反应相当于10拷贝的标准品dna;重复性试验的批内变异系数为0.20%~0.95%;应用所建立方法对临床样品进行检测,其结果与普通rt-pcr结果的符合率为86.7%。本研究建立的实时荧光定量pcr具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于猪感染bvdvs、猪瘟疫苗污染bvdvs的监测。 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract9193.shtml