%0 Journal Article %T 牛源产ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌的分离鉴定及重组毒素制备 %A 袁超文 %A 刘文鑫 %A 关玮琨 %A 孟相秋 %A 唐杰 %A 李星月 %A 赵志腾 %A 师东方 %J 牲畜兽医学报 %P 1336-1341 %D 2014 %X ?产ⅱ型不耐热肠毒素(lt-ⅱ)大肠杆菌是一类能引起严重腹泻的人畜共患肠道致病菌。为了解lt-ⅱ在牛源腹泻性大肠杆菌中的流行情况,本研究对2010—2012年间分离的138株大肠杆菌进行了lt-ⅱ毒素基因的检测,对分离到的10株lt-ⅱ阳性大肠杆菌进行了测序及分析。进一步将lt-ⅱc1毒素基因双顺反子的orf克隆入pet30a表达载体、转化rossatta感受态并诱导表达重组lt-ⅱc1毒素,经y-1小鼠肾上腺皮质细胞对重组毒素进行了初步的毒性验证。结果显示,所分离的10株lt-ⅱ阳性大肠杆菌中,有8株表达lt-ⅱc1毒素,1株表达lt-ⅱc4毒素,1株表达lt-ⅱc6毒素。sds-page和westernblot结果表明成功地制备出lt-ⅱc1重组毒素,该重组毒素可以使y-1小鼠肾上腺皮质细胞发生明显的病变,其细胞最小致死量为17.8pg。本研究为中国国内首次分离到牛源产lt-ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌,为深入研究lt-ⅱ毒素奠定了基础。 %K 大肠杆菌ⅱ型不耐热肠毒素 %K 重组毒素 %K 细胞毒性 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13347.shtml