%0 Journal Article
%T 绵羊<em>apoer</em>2基因克隆及其干扰质粒对睾丸共培养细胞硒蛋白表达的影响
%A 张春香
%A 赵辉
%A 张国林
%A 郭丽娜
%A 任有蛇
%J 牲畜兽医学报
%P 1237-1245
%D 2014
%X ？本研究旨在克隆绵羊apoer2基因，构建apoer2-sirna质粒载体，研究apoer2基因沉默对睾丸共培养细胞selp和phgpx表达的影响。利用rt-pcr技术，克隆apoer2序列，在此基础上构建4种pgpu6/gfp/neo-apoer2-sirna质粒表达载体，利用脂质体将其转染到体外共培养绵羊睾丸细胞中，采用real-timepcr和westernblotting方法，检测其抑制效应，并研究apoer2基因沉默对selp和phgpxmrna表达的影响。本研究成功获得了长度为2490bp的绵羊睾丸apoer2完整编码区序列，共编码892个氨基酸，绵羊apoer2核苷酸序列与牛的同源性最高，相似性为97.7%。apoer2-sirna-1565和apoer2-sirna-2567位点重组质粒的干扰效果较好（p<0.01），选取apoer2-sirna-2567重组质粒，结果显示转染组selp和phgpx表达量显著降低（p<0.01）。获得了绵羊apoer2编码区序列和有效抑制该基因表达的2个质粒载体，apoer2沉默可能影响了睾丸硒蛋白selp和phgpx的表达，为进一步研究apoer2转运硒机理提供了理论依据。
%K apoer2克隆
%K sirna质粒载体
%K 睾丸共培养细胞
%K 硒蛋白表达
%K 绵羊
%U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13327.shtml