%0 Journal Article %T 禽波纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析 %A 田纯见 %A 王宏 %A 罗琼 %A 等 %J 牲畜兽医学报 %D 2012 %X ?利用腺胃扩张症(pdd)患病鹦鹉腺胃rt-pcr阳性病料,接种猪睾丸(st)传代细胞,分离禽波纳病毒(abv),建立实时rt-lamp检测方法。将阳性病料接种st细胞单层传代,出现细胞圆缩、脱落,abv基质蛋白(m)基因扩增产物出现预计大小351bp条带,测序后进化树分析显示为abv5基因型。针对m基因设计id37、id30、id19、id6和id1共5组引物,后3组引物rt-lamp呈阳性反应。利用钙黄绿素建立实时rt-lamp,分别在36(id30)、38(id37)和49(id19)min出现扩增反应曲线,60min内扩增达到峰值。对各种临床样品检测与rt-pcr结果一致,新城疫等类症病毒未见阳性反应,显示较高的特异性;对细胞培养物检测10-1~10-5为阳性,比较rt-pcr敏感性提高约100倍。rt-lamp检测方法的建立为pdd防制提供新的检测方法,也是波纳病公共卫生研究有益的参考。 %K 禽波纳病毒 %K 腺胃扩张症 %K 环介导逆转录恒温扩增 %K 快速检测 %K 进化树分析 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12731.shtml