%0 Journal Article %T 山羊白细胞介素-4成熟蛋白基因的原核表达及其生物学活性检测 %A 张晓燕 %A 严若峰 %A 徐立新 %A 宋小凯 %A 李祥瑞 %J 牲畜兽医学报 %D 2012 %X ?本研究旨在进行山羊成熟白细胞介素-4的体外表达及重组蛋白生物学活性分析。运用pcr技术以pmd18-t-pgil-4(pgil-4为山羊il-4全序列基因)为模板扩增成熟蛋白(mil-4)基因,并构建pet-32a(+)-mgil-4原核表达载体,iptg诱导目的蛋白表达。使用改进的方法纯化目的蛋白后,采用淋巴细胞转化试验检测重组蛋白对山羊外周血t淋巴母细胞的增殖活性。经测序,mil-4含339个核苷酸,编码112个氨基酸。表达的重组蛋白约为31.3ku,主要以包涵体形式表达。通过改进纯化方法获得了高纯度的重组蛋白。试验证明,纯化、复性后的重组蛋白能显著刺激山羊外周血t淋巴母细胞的增殖,并表现出一定的剂量依赖性,8μg·ml-1增殖能力最强。本研究为山羊重组白细胞介素-4的规模化生产及作为佐剂的开发应用奠定了基础。 %K 山羊 %K il-4 %K 表达 %K 生物学活性 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12705.shtml