%0 Journal Article %T 猪戊型肝炎病毒ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 %A 赵菲菲 %A 赵钦 %A 胡守彬 %A 陈福勇 %A 肖一红 %A 周恩民 %J 牲畜兽医学报 %P 950-955 %D 2012 %X ?为获得猪戊型肝炎病毒(hepatitisevirus,hev)ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体,将猪hev衣壳蛋白的c端267(408—675)个氨基酸基因序列克隆入原核表达载体pet-28a(+),构建重组质粒pet-28a-orf2-c,转化e.colirosetta(bl21)感受态细胞进行诱导表达,sds-page和westernblot鉴定,纯化后免疫小鼠。取免疫小鼠的脾脏与鼠骨髓瘤细胞sp2/0融合制备单克隆抗体。通过间接elisa和竞争elisa方法筛选并鉴定单抗。结果表明蛋白得到正确、高效表达,获得3株识别不同的抗原表位区的单克隆抗体,分别命名为mab-1e4(igg1)、mab-2c7(igg1)和mab-2g9(igg2b),其中1e4和2g9能阻断临床阳性猪血清,提示该2株单克隆抗体识别的抗原表位是猪hevⅳ型衣壳蛋白上重要的抗原表位区,而单抗mab-2c7不能阻断。本研究为猪hevⅳ型的诊断及研究提供重要工具。 %K 猪戊型肝炎病毒 %K 衣壳蛋白 %K 单克隆抗体 %K 鉴定 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11298.shtml