%0 Journal Article %T 猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株rt-pcr-rflp鉴别检测方法的建立 %A 胡继明 %A 杨培培 %A 王颖 %A 孙海芳 %A 黄娟 %A 陈俏俏 %A 杨瑞梅 %A 张传美 %A 秦晓冰 %A 单虎 %J 牲畜兽医学报 %P 943-949 %D 2012 %X ?本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株rt-pcr-rflp鉴别检测方法。根据shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒rt-pcr-rflp检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株pcr产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果rt-pcr扩增片段为825bp,产物经rflp分析,野毒株的pcr产物能被apaⅰ酶切为322bp和503bp2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出rna的最低浓度为0.0286μg·ml-1;8株流行野毒株都含gggccc序列(apaⅰ酶切位点),2株疫苗株相应序列为gagccc,不能被apaⅰ酶切;8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与hclv遗传关系近,为基因1群。建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株rt-pcr-rflp检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段。 %K 猪瘟病毒 %K 野毒株 %K 兔化弱毒疫苗株 %K rt-pcr-rflp %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11296.shtml