%0 Journal Article %T 猪瘟病毒多表位基因的表达及其免疫原性分析 %A 田宏 %A 侯相民 %A 吴锦艳 %A 陈妍 %A 尚佑军 %A 刘湘涛 %J 牲畜兽医学报 %P 270-274 %D 2012 %X ?体外表达猪瘟病毒(cfsv)t、b细胞表位,并对表达产物的免疫原性进行分析。人工合成cfsv的多个t、b细胞表位及表位之间的连接linker基因,并将该基因插入pgex6p1表达载体,经酶切和测序鉴定获得重组阳性克隆,成功构建了cfsv复合多表位抗原基因的原核表达质粒pgexbt500,转化e.colibl21,iptg诱导表达,纯化表达产物并免疫兔。结果:通过iptg诱导目的基因可高效表达,sdspage结果表明,以终浓度为0.9mmol·l-1的iptg进行诱导,7h后表达量最高,产物分泌表达,相对分子质量约43ku,表达产量约占菌体总蛋白的30%。westernblotting检测表明,表达的融合蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应;兔攻毒试验表明所免疫表达产物可保护(根据发热反应评价)兔。结果表明表达获得的产物具有良好的反应原性,这为应用该融合蛋白制备csfv免疫血清学诊断试剂和多表位疫苗研究奠定了基础。 %K 猪瘟病毒 %K 复合多表位抗原基因 %K 融合表达 %K 活性分析 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12577.shtml