%0 Journal Article %T 口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条诊断方法的建立 %A 任维维 %A 梁仲 %A 智晓莹 %A 祁光宇 %A 刘湘涛 %A 才学鹏 %A 蒋韬 %J 牲畜兽医学报 %P 255-262 %D 2012 %X ?为了兽医基层工作人员能够快速诊断口蹄疫病原,与其他传染病做鉴别诊断,有必要建立一种快速、简便区分它们的胶体金免疫层析方法。本试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金。将纯化的asia1/china/05流行毒株12s偶联抗原的兔抗体制备免疫胶体金,喷免疫胶体金于玻璃纤维制成金标垫。将纯化a/af72流行株12s偶联抗原的兔抗体和适量o/china/99流行毒株12s偶联抗原的兔抗体混合固定于硝酸纤维素膜上作为检测带。将羊抗兔抗体固定在硝酸纤维素膜的不同区域作为质控带,并组装成口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条。利用其对阴性参考样品、各型阳性参考样品、已知背景的田间样品进行检测。灵敏度试验结果显示:建立的试纸条方法敏感性高、可检测到病毒最低含量为0.98×104ld50;特异性试验显示:在检测与口蹄疫临床症状相似病原——猪水泡病病毒(svdv)、水泡性口炎(vs)、水泡性疹(ves)抗原时无交叉反应;重复性试验显示:不同批次间、同一批次内检测结果完全一致;符合性试验显示:检测国家口蹄疫参考实验室已确定口蹄疫病毒血清型的样品90份,阳性符合率、阴性符合率分别为96.70%、100%。本试验研发的口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,适合国内流行的口蹄疫病原的鉴别诊断。 %K 口蹄疫病毒 %K 偶联 %K 通用型 %K 金标检测试纸条 %K 12s %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12575.shtml