%0 Journal Article %T 鸭疫里默氏菌甲羟戊酸激酶基因的重组表达与免疫保护效果研究 %A 吕敏娜 %A 覃宗华 %A 袁建峰 %A 孙铭飞 %A 余劲术 %A 吴彩艳 %A 蔡建平 %J 牲畜兽医学报 %P 1006-1011 %D 2010 %X ?在从鸭疫里默氏菌(ra)基因组文库筛选毒力基因的过程中,作者获得了编码ra甲羟戊酸激酶的基因(ramva),将该基因片段提交genbank,收录号为gq398751。测序分析结果显示其开放阅读框长492bp,共编码163个氨基酸。根据序列信息设计引物,用pcr方法从ra中扩增出ramva的编码区并与表达质粒pmal-c2x连接,构建重组质粒pmalramva。经限制性酶切和序列测序鉴定序列正确无误后将pmal-ramva转化至e.colibl21(de3)构建重组表达菌e.colibl21/pmal-c2x-ramva。用iptg诱导重组菌成功诱导ramva的表达,通过sds-page分析表达产物,表达量占全菌总蛋白的15.6%,且重组表达的甲羟戊酸激酶在大肠杆菌中表达时以可溶性状态存在。雏鸭免疫试验表明,接种重组表达菌e.colibl21/pmal-c2x-ramva2周后,可产生对ra致死量攻击达42.3%的免疫保护率。 %K 鸭疫里默氏菌 %K 甲羟戊酸激酶 %K 表达 %K 免疫保护 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12425.shtml