%0 Journal Article %T 荷斯坦奶牛瘤胃微生物脲酶的分离与鉴定 %A 赵圣国 %A 王加启 %A 刘开朗 %A 李旦 %A 于萍 %A 卜登攀 %J 牲畜兽医学报 %P 692-696 %D 2010 %X ?本研究旨在从荷斯坦奶牛瘤胃中分离活性脲酶。从奶牛瘤胃中收集瘤胃内容物,通过离心和超声破碎的方法得到不含菌体细胞的瘤胃液(cfrf)和瘤胃菌体蛋白液(rcp),利用85%硫酸铵盐析,并透析后,用hitrapcaptoq离子交换层析柱纯化脲酶。将纯化后的脲酶用活性page分离,并利用改良的fishbein染色法,确定脲酶条带位置,切胶,经胰蛋白酶消化后,用lc-ms/ms分析,并用sequest软件在ncbi数据库搜索与质谱信号相匹配的肽段和蛋白质。结果表明从cfrf和rcp中分离出较高活性的脲酶,但经染色后只有rcp脲酶显示活性条带。经质谱分析,最终鉴定出了3种微生物来源脲酶,分别与嗜热链球菌(streptococcusthermophilus)、唾液链球菌(streptococcussalivarius)和嗜碱芽孢杆菌(bacillushalodurans)相似。这说明绕过纯培养微生物,直接从瘤胃中分离脲酶,来研究其性质和来源是可行的,尤其适合对未培养微生物的研究。 %K 瘤胃脲酶 %K 分离纯化 %K 活性电泳 %K lc-ms/ms %K 蛋白质组 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12474.shtml