%0 Journal Article
%T 表达o型口蹄疫病毒p12a3c基因的山羊痘病毒弱毒株的构建及筛选
%A 王建科
%A 张云德
%A 张强
%A 吴国华
%A 颜新敏
%A 朱海霞
%A 李健
%A 邵长春
%A 朱彩珠
%A 吴磊
%J 牲畜兽医学报
%P 434-441
%D 2010
%X ？为构建和筛选表达o型口蹄疫病毒p12a3c基因的山羊痘病毒弱毒株，用已构建的口蹄疫病毒o/china99毒株的egfpp7.5p12a3c基因整体通过平末端连接到kpnⅰ酶切后的线性载体puc119tk中，得到重组载体puc119tkegfpp7.5p12a3c。重组载体通过缺失的tk基因与羊痘病毒弱毒株在bhk21细胞中同源重组，用egfp作为标记筛选出重组毒株，并进行pcr鉴定、抗原捕获elisa试验检测及westernblot分析。结果显示该重组弱毒株能在1~10代bhk21细胞中稳定传代,扩增出约3000bp片段，并经测序确证为基因p12a3c；抗原捕获elisa试验检测均为阳性；westernblot分析表明转移载体puc119tkegfpp7.5p12a3c在感染的gtpvav41bhk21细胞中表达的蛋白可被o型fmdv高免血清特异性识别，并具有反应原性。这些结果表明获得了表达o型口蹄疫病毒p12a3c基因的重组山羊痘弱毒株。
%K 口蹄疫病毒
%K 启动子p7.5
%K p12a3c基因
%K 羊痘病毒
%U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract8875.shtml