%0 Journal Article %T 猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌联合检测芯片的研制及应用 %A 肖国生 %A 曹三杰 %A 黄小波 %A 文心田 %J 牲畜兽医学报 %P 77-85 %D 2010 %X ?本研究旨在建立联合检测胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的dna芯片。用7个从3种病菌基因组中扩增出的不同特异性靶dna制作基因芯片,并对芯片的靶dna和探针浓度、杂交温度、重复性、特异性和灵敏度进行了研究。结果表明,检测芯片的特异性强,能与测试的李氏放线杆菌、猪鼻支原体和副猪嗜血杆菌等9种病原区分;灵敏度高,在50μl标记反应体系中,能检测到10~50pg基组dna,芯片可重复利用。用芯片对44株目标菌的不同型标准菌株、分离株和疫苗株进行了检测,其信号值≥1000,信号噪音比(snr)≥6。用芯片对45头病猪和97头健康猪的临床样品选择培养物进行了检测,其检出率分别为多杀性巴氏杆菌71.1%和49.5%、胸膜肺炎放线杆菌42.2%和26.8%、猪肺炎支原体20%和22.7%,混合感染率分别为42.2%和24.7%。在检测临床样品时,芯片法与pcr的符合率为97.8%~100%,与分离鉴定法的符合率为87.6%~95.6%。研究表明,研制的芯片特异性强、敏感性高、可重复使用,是一种能有效用于胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和猪肺炎支原体鉴定和联合检测的新工具。 %K 基因芯片 %K 胸膜肺炎放线杆菌 %K 猪肺炎支原体 %K 多杀性巴氏杆菌 %K 检测 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract9453.shtml