%0 Journal Article %T 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白翻译起始位点的研究 %A 谭菲菲 %A 张荣 %A 韦祖樟 %A 袁世山 %J 牲畜兽医学报 %P 847-853 %D 2010 %X ?猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,prrsv)核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein,n蛋白)的表达是通过非连续性转录合成的亚基因组(subgenomic,sg)mrna翻译而来。但位于亚基因组前导序列中的2个aug均不能作为n蛋白翻译的起始位点,其翻译使用的是n开放阅读框(orf)中的首个aug,因此,本研究旨在感染性克隆的基础上研究n蛋白的翻译起始位点。作者实验室已有在orf6和orf7之间插入酶切位点的感染性克隆porf673,该突变克隆中含有3个潜在的aug,分别构建了porf673中n蛋白的其中2个潜在的起始密码子aug突变的全长克隆,转染marc-145细胞。这些突变体都能够拯救出子代病毒,其中2个突变病毒的n蛋白的前11个氨基酸完全改变,这些突变病毒都能够在marc-145细胞上稳定传代。经rt-pcr分析子代病毒的n基因序列及其亚基因组序列,结果表明n蛋白的翻译偏向于使用其orf的第1个潜在的aug。如果后者移码,则病毒可以自身修复,这是首次发现病毒有矫正orf的功能。本研究为n蛋白n端插入标签作为标记疫苗以及进一步研究n蛋白结构与功能奠定了基础。 %K prrsv %K 反向遗传操作 %K 核衣壳蛋白 %K 翻译调控 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract12448.shtml