%0 Journal Article %T 多头带绦虫tm7基因的表达及间接elisa检测方法的建立 %A 安晓雪 %A 杨光友 %A 王颖旺 %A 牟静 %A 阳爱国 %A 古小彬 %A 杨应东 %A 韦雷飞 %A 文建国 %A 王淑贤 %A 边尧 %J 牲畜兽医学报 %P 1302-1308 %D 2011 %X ?以多头带绦虫tm7重组蛋白为抗原,建立动物多头蚴病早期诊断方法。本研究从羊脑多头蚴原头节提取总rna,采用rt-pcr技术首次扩增出tm7基因的全序列,该基因的开放阅读框为207bp,编码68个氨基酸。将此基因克隆到pet-32a(+)载体,构建重组表达质粒pet-32a-tm7,经转化大肠杆菌bl21(de3)后iptg诱导表达,用sds-page和westernblot检测表达产物。以纯化后的表达蛋白作为抗原,建立检测羊脑多头蚴病抗体的重组蛋白间接elisa方法。研究结果表明,tm7基因在大肠杆菌中成功表达,表达产物为约27ku的融合表达蛋白,该蛋白能识别羊脑多头蚴病阳性血清。建立的间接elisa方法,检测敏感性可达93.3%,特异性达94.1%,研究结果表明tm7重组蛋白可作为脑多头蚴病的诊断抗原。 %K 脑多头蚴 %K 重组抗原 %K tm7 %K 间接elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract9221.shtml