%0 Journal Article %T 弓形虫mic3基因真核表达质粒的构建及在ibrs-2细胞内的表达 %A 江涛 %A 张东林 %A 聂浩 %A 姚宝安 %A 赵俊龙 %J 牲畜兽医学报 %P 827-831 %D 2007 %X ?采用pcr技术从弓形虫rh株的基因组dna中扩增编码mic3的基因,克隆入pmd18t载体,转化至e.colidh5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、pcr及dna测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcdna3.1。然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染ibrs-2细胞,在g418压力下进行筛选,利用sds-page、westernblot和elisa检测表达情况。结果显示,扩增的mic3基因与genbank上相应基因序列(aj132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcmic3能在转染的ibrs-2细胞中表达分子量约为39.2ku的mic3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。 %K 刚地弓形虫 %K mic3 %K 基因克隆 %K 真核表达 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11820.shtml