%0 Journal Article %T 小反刍兽疫病毒n基因重组杆状病毒的构建及间接elisa抗体检测方法的建立 %A 李伟 %A 李刚 %A 吴晓东 %A 邱文英 %A 张坤 %A hermannunger %J 牲畜兽医学报 %P 1147-1153 %D 2010 %X ?本研究旨在建立基于真核表达的小反刍兽疫病毒(pprv)n蛋白的诊断小反刍兽疫的间接elisa方法。利用bac-to-bac杆状病毒昆虫表达系统,构建含有pprvn基因的重组供体质粒pfastbachta-n,转化e.colidh10bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒pbacmidpprv-v,转染昆虫细胞sf21,获得含有pprvn基因的重组杆状病毒。用重组病毒感染昆虫细胞后,sds-page鉴定出60ku左右的表达蛋白,westernblot检测该蛋白具有很好的反应原性。以重组bacmidpprv-n蛋白作为包被抗原,建立间接elisa检测方法。临床检测来自西藏疫区的37份山羊血清和来自青海省非疫区的92份山羊血清,与法国蒙彼利埃农学发展研究国际合作中心(cirademvt)提供的竞争elisa试剂盒相比较,特异性为96.2%,敏感性为100%,二者的符合率达到96.9%。结果表明本研究建立的间接elisa方法可以很好地用于小反刍兽疫的临床诊断。 %K 小反刍兽疫病毒 %K 杆状病毒 %K 昆虫细胞 %K 间接elisa %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract11869.shtml