%0 Journal Article %T talens编辑绵羊成纤维细胞fgf5基因 %A 皮文辉 %A 周平 %A 王立民 %A 唐红 %A 郭延华 %A 张译元 %A 刘守仁 %A 王新华 %J 牲畜兽医学报 %P 704-710 %D 2015 %X ?类转录激活因子效应物(transcriptionactivator-likeeffector,tale)已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具,在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变。针对绵羊成纤维细胞生长因子5(fibroblastgrowthfactor5,fgf5)基因起始密码子atg位点,设计构建talens(transcriptionactivator-likeeffectornucleases,talens)。通过比较分析正常培养和基因组编辑处理的绵羊成纤维细胞,电转talens组合,surveyor突变检测,筛选获得1对有效的talens。有限稀释细胞传代培养,pcr扩增fgf5基因片段,经page检测筛选发生突变的细胞,测序确认fgf5基因atg位点产生缺失突变细胞。获得具有编辑活性的talens,为该基因的定点编辑奠定基础。surveyor检测和测序结果表明,在绵羊fgf5基因atg起始密码子上游104碱基位点,存在1个g/c单核苷酸多态。 %K 类转录激活因子效应物核酸酶 %K 基因组编辑 %K 成纤维细胞生长因子5基因 %K 单核苷酸多态 %K 绵羊 %U http://118.145.16.233/Jweb_xmsy/CN/abstract/abstract13563.shtml